首页 » CRISPR产品和服务 » 同源介导修复(HDR)基因敲入模板 » CRISPR基因敲入优化试剂盒
* 欢迎咨询基因敲入增强剂(Enhancer),您可以联系技术支持了解详情或订购,邮箱: oligo@topshowqb.com ,电话:400-025-8686转5812或5815。
1. 请选择您需要的目的基因敲入位点:
2. 请选择您需要的基因敲入模板:
3. 请选择您需要的基因敲入模板:
4. 您是否需要在您的基因敲入模板上增加CTS序列去提升敲入效率?
(CTS设计提升编辑效率的方案详见和案例分享
,实验操作详见操作指南)
请查收您的定制化试剂盒,按照《尊龙凯时人生就是搏的实验操作指南》的推荐试剂剂量,可以用于约12个反应的实验(Lonza 4D电转平台),或用于25个反应的实验(Neon电转平台),您可以根据您的实验体系和试剂用量增减产品数量,确保每个组分的交付量足够支持您开展实验。
货号 | 产品名称 | 数量 |
---|---|---|
KIOK1-1.5
|
SafeEdit TRAC sgRNA - 1.5 nmol | |
KIOK1-3
|
SafeEdit TRAC sgRNA - 3 nmol | |
KIOK1-6
|
SafeEdit TRAC sgRNA - 6 nmol | |
KIOK2-1.5
|
SafeEdit RAB11A sgRNA - 1.5 nmol | |
KIOK2-3
|
SafeEdit RAB11A sgRNA - 3 nmol | |
KIOK2-6
|
SafeEdit RAB11A sgRNA - 6 nmol | |
KIOK3-100
|
Ultra eSpCas9 - 100 μg | |
KIOK3-200
|
Ultra eSpCas9 - 200 μg | |
KIOK3-400
|
Ultra eSpCas9 - 400 μg | |
KIOK4-100
|
Ultra WTSpCas9 - 100 μg | |
KIOK4-200
|
Ultra WTSpCas9 - 200 μg | |
KIOK4-400
|
Ultra WTSpCas9 - 400 μg | |
KIOK5
|
ssDNA_TRAC_EGFP - 50 μg | |
KIOK6
|
ssDNA_TRAC_EGFP_CTS - 50 μg | |
KIOK7
|
dsDNA_TRAC_EGFP - 50 μg | |
KIOK8
|
dsDNA_TRAC_EGFP_CTS - 50 μg | |
KIOK9
|
ssDNA_RAB11A_GFP - 50 μg | |
KIOK10
|
ssDNA_RAB11A_GFP_CTS - 50 μg | |
KIOK11
|
dsDNA_RAB11A_GFP - 50 μg | |
KIOK12
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dsDNA_RAB11A_GFP_CTS - 50 μg | |
KIOK13
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TRAC CTS Annealing Oligo - 2 nmol | |
KIOK14
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RAB11A CTS Annealing Oligo - 2 nmol |
备注:ssDNA选择含CTS模板必须配套使用对应位点的退火引物,dsDNA本身即为双链无需退火
您可以根据实际需求选择加购以下产品:
货号 | 产品名称 | 数量 |
---|---|---|
KIOK3-100
|
Ultra eSpCas9 - 100 μg | |
KIOK3-200
|
Ultra eSpCas9 - 200 μg | |
KIOK3-400
|
Ultra eSpCas9 - 400 μg | |
KIOK4-100
|
Ultra WTSpCas9 - 100 μg | |
KIOK4-200
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Ultra WTSpCas9 - 200 μg | |
KIOK4-400
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Ultra WTSpCas9 - 400 μg |
参考文献
UCSF Marson Lab 开发了一种含CTS设计的敲入模板,在两端添加了Cas9蛋白靶向序列(CTS),两端序列中互补的序列通过退火形成了双链DNA。整个HDR模板中,待插入基因左右两侧为同源臂序列,同源臂序列外端为CTS序列,CTS包含PAM序列、gRNA序列和一段边缘核苷酸序列。
通过这种设计,CTS可以让RNP(Cas9+sgRNA)与敲入模板整合在一起进行电转,促进其进入宿主细胞的细胞核,这种设计可以让基因敲入模板更接近RNP的切割位点,从而提升目标基因插入效率。通过添加CTS设计,GMP适用规模的GenExact™ ssDNA 在未添加增强剂的条件下,敲入效率可高达46.2%(图3)。